Príprava obohacovacieho média Petriho misky je základnou zručnosťou v mikrobiológii, ktorá je nevyhnutná na kultiváciu a štúdium rôznych mikroorganizmov. Ako dodávateľ Petriho misky chápem dôležitosť poskytovania vysokokvalitných výrobkov a zdieľania relevantných znalostí. V tomto blogu vás sprevádzam procesom prípravy Petriho misky na obohatenie médií krok za krokom.
Pochopenie obohacovania médií
Obohacovacie médiá sú formulované tak, aby podporovali rast špecifických mikroorganizmov a zároveň potláčali rast ostatných. Obsahujú živiny, rastové faktory a selektívne látky, ktoré uprednostňujú cieľové organizmy. Napríklad, ak máte záujem o izoláciu konkrétneho kmeňa baktérií, ktoré vyžaduje špecifickú aminokyselinu, obohacovacie médium sa s touto aminokyselinou doplní.
Potrebné materiály
- Petriho jedlá: Vysoké - kvalitné Petriho jedlá sú rozhodujúce pre úspešnú kultiváciu. Ponúkame širokú škáluLaboratórne sklo 90 mm 100 mm 120 mm sklenené petri misa s viečkamiaLab Glass Petri Dishktoré sú vyrobené z prémiového skla, zabezpečujú optimálnu transparentnosť a trvanlivosť.
- Obohatenie: V závislosti od cieľového mikroorganizmu budete musieť vybrať vhodné obohacovacie médiá. Môžete si kúpiť pred - vyrobené médiá, alebo ich pripraviť od nuly pomocou jednotlivých komponentov.
- Autokláve: Toto sa používa na sterilizáciu médií a petriho misiek, aby sa zabránilo kontaminácii.
- Pipeta a tipy: Pre presné meranie a prenos médií a vzoriek.
- Bunsen horák alebo zdroj tepla: Sterilizovať pipety a ďalšie nástroje počas procesu.
- Sterilný pracovný stôl alebo laminárny prietok: Udržiavať sterilné prostredie pri práci.
Krok - príprava kroku
1. Pripravte obohacovacie médiá
- Zvážiť: Ak vyrábate médiá od nuly, opatrne zvážte každú komponent podľa receptu. Nezabudnite používať čistú a kalibrovanú rovnováhu. Napríklad, ak médium vyžaduje 10 gramov peptónu, 5 gramov kvasinkového extraktu a 2 gramy chloridu sodného, zmerajte tieto množstvá presne.
- Rozpúšťajte komponenty: Preneste vážené komponenty do čistej banky alebo kadičky. Pridajte destilovanú vodu do banky a jemne premiešajte pomocou magnetického miešania alebo sklenenej tyče, kým sa všetky komponenty úplne nerozpustia. V prípade potreby mierne zahrievajte zmes, ale vyhýbajte sa prehriatiu.
- Upraviť: Na meranie pH média použite pH meter. Väčšina mikroorganizmov rastie najlepšie v rámci špecifického rozsahu pH. Napríklad veľa baktérií uprednostňuje mierne alkalické pH okolo 7,2 - 7,4. PH upravte podľa potreby pridaním malého množstva kyseliny alebo bázy.
- Pridajte selektívne agenti (ak je to možné): Ak je obohacovacie médiá navrhnuté tak, aby vybrali pre konkrétnu skupinu mikroorganizmov, v tejto fáze pridajte príslušné selektívne látky. Napríklad, ak sa snažíte izolovať baktérie negatívnych gramov, môžete pridať kryštálové fialové alebo žlčové soli, aby ste inhibovali rast gram -pozitívnych baktérií.
2. Sterilizujte médiá
- Autoklácia: Preneste pripravené médiá do vhodných nádob, ako sú fľaše alebo fľaše s skrutkami. Mierne uvoľnite čiapky, aby ste mohli počas autoklávovania uniknúť pary. Vložte nádoby do autokláve a nastavte príslušné parametre. Všeobecne sa médiá autoklávujú pri 121 ° C počas 15 - 20 minút, aby sa zabezpečila úplná sterilizácia.
- Chladenie: Po autoklávovaní opatrne odstráňte nádoby z autoklávu a nechajte ich vychladnúť na približne 50 - 55 ° C. Táto teplota je ideálna na nalievanie médií do petriho misiek bez toho, aby spôsobila neskôr tepelné poškodenie mikroorganizmov.
3. Pripravte si Petriho jedlá
- Sterilizácia: Ak používate naše sklenené Petriho misky, mali by byť pred - sterilizované. Je však dobré zdvojnásobiť - skontrolovať. Petriho misky môžete umiestniť do autoklávu pri 121 ° C počas 15 - 20 minút, ak je to potrebné.
- Nastavte sterilný pracovný priestor: Pracujte v sterilnom prostredí, ako je laminárna prietoková kapucňa alebo sterilný pracovný stôl. Vyčistite pracovný priestor dezinfekčným prostriedkom a pred začatím práce na zabíjaní akýchkoľvek kontaminantov vo vzduchu zapnite UV svetlo najmenej 15 minút.
4. Nalejte médiá do Petriho jedál
- Plameň krk nádoby: Pomocou horáka Bunsen jemne plameň krk kontajnera, ktorý drží chladené médiá. Pomáha to zabrániť tomu, aby ste akýchkoľvek kontaminantov vstúpili do médií, keď ich nalejete.
- Nalejte médiá: Mierne otvorte veko Petriho misky a médiá nalejte do misky. Cieľom je pokryť spodnú časť misky rovnomerne vrstvou média asi 3 - 5 mm hrúbky. Dávajte pozor, aby ste médiá rozliali mimo misky.
- Umožnite médiám upevniť: Akonáhle sa médiá naliajú, položte veko späť na Petriho misu a nechajte ho nerušene sedieť, až kým médiá stuhne. Zvyčajne to trvá asi 15 - 30 minút, v závislosti od typu médií.
5. Označte a uložte Petriho jedlá
- Označenie: Použite trvalý marker na označenie Petriho jedál typu médií, dátum prípravy a akékoľvek ďalšie relevantné informácie, ako napríklad cieľový mikroorganizmus.
- Ukladanie: Uložte pripravené Petriho jedlá na chladnom a tmavom mieste. Jedlá môžete opatrne stohovať, aby ste ušetrili priestor. Ak okamžite nepoužívate riad, môžete ich uložiť v chladničke pri 4 ° C, aby ste predĺžili životnosť na trvanlivosť.
Riešenie problémov
- Kontaminácia: Ak si všimnete akékoľvek známky kontaminácie, ako je napríklad rast húb alebo nezvyčajné kolónie v médiách, zlikvidujte postihnuté Petriho jedlá. Nezabudnite skontrolovať svoje sterilizačné techniky a nabudúce pracovať v sterilnejšom prostredí.
- Médiá, ktoré sa nespevňujú: Môže to byť spôsobené nesprávnymi pomermi komponentov alebo nedostatočnej autoklácie. Skontrolujte recept a uistite sa, že ste správne postupovali podľa pokynov pre autokláciu.
- Nerovnomerná distribúcia médií: Ak médiá nie sú rovnomerne distribuované v Petriho miske, mohlo by to byť preto, že jedlo nebolo pri nalievaní médií na úrovni. Počas procesu nalievania nezabudnite položiť misku na rovný povrch.
Záver
Príprava Petriho misky na obohatenie je podrobným, ale obohacujúcim procesom. Dodržiavaním vyššie uvedených krokov a použitím vysoko kvalitných Petriho jedál z našich dodávok môžete vytvoriť ideálne prostredie na kultiváciu a štúdium mikroorganizmov. Či už ste výskumný pracovník v laboratóriu, študent v mikrobiologickej triede alebo niekto, kto sa zaujíma o mikrobiálnu kultúru doma, je nevyhnutné mať správne nástroje a vedomosti.
Ak máte záujem o nákup našich vysoko kvalitných Petriho jedál pre váš ďalší projekt, radi by sme sa od vás dozvedeli. Neváhajte a kontaktujte nás, kde nájdete ďalšie informácie a prediskutujte svoje potreby obstarávania. Náš tím sa venuje poskytovaniu najlepších produktov a služieb na splnenie vašich požiadaviek.
Odkazy
- Atlas, RM (2010). Príručka mikrobiologických médií. CRC Press.
- Pelczar, MJ, Chan, ECS a Krieg, NR (2007). Mikrobiológia: Koncepty a aplikácie. McGraw - Hill.